在生物制藥生產的哺乳動物細胞培養過程中如何在線監測蛋白？
發布時間：2024-08-26 瀏覽次數：332
近年來，生物制藥市場迅速增長，創造了一個高度競爭的舞臺。在過程優化方面，目前缺乏簡單、快速和經濟有效的、允許在工藝開發和生產過程中對特定蛋白質進行常規在線監測的設備。
關鍵發現
本文報道了一種多功能的微流控蛋白分析盒，允許多路珠子免疫檢測直接從復雜的混合物中檢測特定蛋白。對中國倉鼠卵巢（CHO）宿主細胞蛋白作為關鍵雜質，單克隆抗體作為目標生物藥物，乳酸脫氫酶作為細胞活力的標記物進行比色定量，檢測范圍為1?10 ng/mL，分析時間短至30 min。該裝置進一步被證明用于在8天內監測利妥昔單抗產生的CHO細胞生物反應器，提供了與標準酶聯免疫吸附試驗（ELISA）試劑盒相當的回收率。高靈敏度結合對矩陣干擾的魯棒性，突出了該設備執行從生物反應器到下游處理的在線測量的潛力。
結論
總的來說，考慮到制備珠狀包裝設備的試劑要求較低和最少的處理時間，該設備顯示出作為多功能、可擴展、一次性蛋白質定量盒的顯著潛力，只需要目標樣品的自動化順序流動，添加相應的檢測器抗體和酶底物。此外，這些檢測方法可以擴展到任何基于親和力的蛋白質檢測，通過與各自的靶點結合性能來表征單抗功能，以及在任何細胞培養中其他治療性糖蛋白或生長因子的應用。此外，基于印跡TMB底物的信號轉導可以很容易地與任何成像設備集成，而不需要單色器或濾光裝置，甚至相對于標準樣品或內部控制進行視覺解釋。在與工業合作伙伴的合作中，正在開展將設備材料轉變為可擴展的熱塑性塑料，使用自動化機器人工作站集成液體處理，并通過一個獨立平臺上的微型光學傳感器實現信號轉導，以提高處理性、可擴展性和分析魯棒性。
圖1 用于珠狀免疫分析的微流控盒示意圖。該多路復用裝置包括四個互聯柱，充滿不同的偶聯珠，每個珠針對一個特定的蛋白質：(i) CHO六方最密堆積，（ii）IgG，（iii）LDH，并包括（iv）一個內部陽性對照
來源：微生物安全與健康網，作者~陳諾
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